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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,，分子量很小，在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,，并滲入正在復制的DNA分子,，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單,、快速、準確地檢測出細胞增殖情況,。與BrdU檢測方法相比,，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,，而且小分子化學反應檢測方法反應快,，效率高，反應時間需幾分鐘,，不需要DNA變性,、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,，能夠更好地保護細胞形態(tài),，更簡單、更靈敏,、更快速,、更準確,。EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題？江西哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家
EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物,，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈,。通過以上原理圖的對比，大家不難發(fā)現(xiàn),，EdU法檢測細胞增殖,，無須抗體，無變性步驟,，保持細胞形態(tài)和DNA完整性,，是一種簡單，可靠,，省事的創(chuàng)新方法,。但是，現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效,，節(jié)約反應時間的方法,。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號，分別匹配的是兩種不同的熒光通道,，細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光),，KTA2030，488通道,；細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光),，KTA2031，549通道河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好EdU細胞增殖檢測試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級應用,。
EdU法中的點擊反應原理圖,。摻入到細胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標記的疊氮化物，在銅離子的催化下發(fā)生共價反應,，形成穩(wěn)定的三唑環(huán),，使細胞DNA標記上熒光探針或生物素。細胞增殖檢測是評估細胞活性,、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎實驗手段,。細胞增殖檢測的方法按照原理通常可以分為五類：膜損傷檢測,、代謝活性檢測,、ATP水平測定、DNA合成檢測和細胞熒光標記檢測法,。目前公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成
EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,，制成2xEdU標記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,，獲得lxEdU溶液,，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度,；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜,；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài),；2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘,，以除去未摻入DNA的EdU殘留,。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。你知道EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點嗎,？
可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發(fā)光法)進行細胞群落中DNA合成測定（BrdUbased）,。優(yōu)點是：實驗結(jié)果同增殖細胞數(shù)目緊密相關(guān)，可一步完成細胞的溫和固定和變性,，操作方便穩(wěn)定,，不破壞細胞形態(tài)。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI（熒光法）或KitII（AP）可使用試劑盒提供的BrdU單抗,，以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,，檢測單細胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通過免疫熒光檢測,，后者通過熒光顯微鏡檢測,。優(yōu)點是：使用核酸酶變性DNA，在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU,。EdU細胞增殖檢測試劑盒可以去哪里購買,？江西口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒價格
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另一方面,，EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應,，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應非常迅速,，被稱作點擊反應(Clickreaction),，其反應原理參見圖1。通過點擊反應,，新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,，從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。圖1.BeyoClick?EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,，在銅離子的催化發(fā)生共價反應,，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細胞DNA標記上生物素等探針,。本試劑盒反應簡單,、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,，無需DNA變性,，只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU，并且可以檢測到單個細胞的增殖情況,。江西哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家
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