原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建,。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果,，它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng),，其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素,。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系,，為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià),、化妝品安全性評(píng)價(jià),、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段,。這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),，是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,，但這些方法存在著很多的局限性和缺陷,。例如，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅存在著倫理和道德問題,，而且還存在著種屬差異,、生理反應(yīng)差異等問題；而體外細(xì)胞培養(yǎng)則存在著細(xì)胞失活,、細(xì)胞分化等問題,。因此，Organ-on-a-chip的出現(xiàn),，填補(bǔ)了這些傳統(tǒng)方法的空白，為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了更加可靠和有效的手段,。立沃生物原代肝細(xì)胞配套有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),，對(duì)后續(xù)的細(xì)胞復(fù)蘇，培養(yǎng),，實(shí)驗(yàn)開展提供強(qiáng)有力的技術(shù)保障,。上海新西蘭兔原代肝細(xì)胞貼壁

原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primary hepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞,。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn)：1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致，酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,，可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性,；2.較好保留和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性，真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況,。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高,，原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究：4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究；5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制,；6.預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用,；7.研究藥物的細(xì)胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)和研究的相關(guān)技術(shù)對(duì)于提升相關(guān)試驗(yàn)的成功率非常有幫助,。浙江牛原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基原代肝細(xì)胞是一種重要的研究工具,，可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持,。

原代肝細(xì)胞是藥物的毒性研究的重要組成部分。藥物通過肝臟代謝后,，大多數(shù)藥物的毒性被消除,，但同時(shí)也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì)，因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ,。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型,，尤其是在檢測(cè)結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí)，原代肝細(xì)胞的角色更為重要,。人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型,。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者凍存待用,。原代肝細(xì)胞是肝臟疾病的研究以及相應(yīng)藥物的開發(fā)的重要載體,。比如一些對(duì)于乙肝病毒的研究需要對(duì)肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)；一些嚴(yán)重肝臟疾病的細(xì)胞移植研究也要涉及到對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行大量擴(kuò)增,。因此,，原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。

保存溫度是影響原代肝細(xì)胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一,。一般來說,，原代肝細(xì)胞的保存溫度為4℃，但是在這種溫度下,，細(xì)胞的代謝活動(dòng)仍然會(huì)繼續(xù)進(jìn)行,，導(dǎo)致細(xì)胞的壽命有限。因此,，為了延長原代肝細(xì)胞的壽命,，可以將其保存在低溫下，如-80℃或液氮中,。這種保存方式可以有效地減緩細(xì)胞的代謝活動(dòng),，延長細(xì)胞的壽命，但是在保存過程中需要注意加入凍存液,，防止細(xì)胞凍結(jié)損傷,。原代肝細(xì)胞的運(yùn)輸也是一個(gè)重要的問題。在運(yùn)輸過程中,，細(xì)胞可能會(huì)受到振動(dòng),、溫度變化、氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響,，導(dǎo)致細(xì)胞失活或功能受損,。為了保證細(xì)胞的完整性和功能性，可以采用液氮運(yùn)輸?shù)姆绞?，即在低溫下運(yùn)輸細(xì)胞,。在運(yùn)輸前給細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)和氧氣,，也可以增強(qiáng)其抵抗不利因素的能力。人原代肝細(xì)胞的獲取和保存非常困難,，且存在批次差異和有限的增殖能力,，因此在實(shí)際應(yīng)用中受到了一定的限制。

在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，如何檢測(cè)污染情況,？在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中，檢測(cè)污染情況是非常重要的,，可以通過以下幾種方法進(jìn)行檢測(cè)：1.肉眼觀察：通過肉眼觀察培養(yǎng)物的外觀,、顏色、透明度等是否異常,，如果出現(xiàn)渾濁,、變色、沉淀等異常情況,，可能是污染所致,。2.顯微鏡觀察：使用顯微鏡觀察培養(yǎng)物中的細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量,、分布等是否異常,，如果出現(xiàn)細(xì)胞變形、破裂,、死亡等異常情況,，可能是污染所致。3.細(xì)菌培養(yǎng)：將培養(yǎng)物接種到細(xì)菌培養(yǎng)基中,，觀察是否有細(xì)菌生長，如果有細(xì)菌生長,，說明培養(yǎng)物受到了細(xì)菌污染,。：使用PCR技術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)物中的細(xì)菌、病毒等微生物的DNA,，如果檢測(cè)到DNA存在,，說明培養(yǎng)物受到了污染?？傊?，在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要定期進(jìn)行污染檢測(cè),，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理污染,，以保證培養(yǎng)物的質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。立沃生物原代肝細(xì)胞可以用于肝臟疾病研究,、藥物代謝和藥物毒性,、篩選藥物和測(cè)試藥物的毒性等方面的研究,。廣州小鼠原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)

懸浮肝細(xì)胞主要應(yīng)用于藥物代謝研究，一般使用多供體混合懸浮肝細(xì)胞,，適用于試驗(yàn)周期比較短的實(shí)驗(yàn),。上海新西蘭兔原代肝細(xì)胞貼壁

原代肝細(xì)胞的融合度是影響其生長和增值能力的重要因素之一。當(dāng)融合度達(dá)到70%以上時(shí),，細(xì)胞開始進(jìn)入高度同步狀態(tài),，細(xì)胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮，從而促進(jìn)了細(xì)胞的生長和增殖,。但是,，如果融合度低于70%，細(xì)胞之間的相互作用就會(huì)受到限制,，導(dǎo)致細(xì)胞的增值能力受到限制,，無法達(dá)到100%。此外,，細(xì)胞之間的距離也是影響細(xì)胞生長和增值能力的重要因素之一,。當(dāng)細(xì)胞之間的距離剛好是黃金分割點(diǎn)時(shí)，細(xì)胞開始進(jìn)入高度同步狀態(tài),，細(xì)胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮,，從而促進(jìn)了細(xì)胞的生長和增殖。但是,，如果細(xì)胞之間的距離超過了黃金分割點(diǎn),，細(xì)胞就無法進(jìn)入高度同步狀態(tài)，從而導(dǎo)致細(xì)胞的增值能力受到限制,。細(xì)胞的培養(yǎng)密度也是影響細(xì)胞生長和增值能力的重要因素之一,。低密度培養(yǎng)雖然可以保持細(xì)胞的功能，但是細(xì)胞的增值能力會(huì)很快丟失,。而高密度培養(yǎng)可以維持細(xì)胞的功能一段時(shí)間,，但是也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞之間的相互作用受到限制，從而影響細(xì)胞的生長和增殖,。因此,，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)密度,，以保證細(xì)胞的生長和增值能力得到正常的發(fā)揮,。上海新西蘭兔原代肝細(xì)胞貼壁

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